Bestimmung der Zellzahl in einer Microcarrier Zellsuspension
mit dem NucleoCounter®
Microcarrier zur Kultivierung von adhärenten Zellen
Für die Herstellung von Impfstoffen, Medikamenten und zellulären Produkten für die Anwendung in der Zelltherapie ist ein großer Produktionsmaßstab unerlässlich. Die Erhöhung der Virus- und Zellproduktion zur Prozessoptimierung kann sich jedoch als problematisch erweisen, da adhärente Zellen oftmals in Zellkulturflaschen expandiert werden. Eine platzsparende und geeignete Alternative hierzu stellt die Verwendung von Microcarriern dar. Microcarrier dienen als Substrat für die Adhäsion von adhärenten Zellen und erlauben die Zellexpansion in großem Maßstab in einem Bioreaktor, wobei die einzelnen Microcarrier Zellkomplexe in einer Nährlösung als Suspension vorliegen. Dieser Ansatz optimiert und vereinfacht den Produktionsprozess entscheidend.
Technical Note (.PDF):Das Zählen von Zellkernen
Zeitsparende Zählung einer Microcarrier Zellsuspension
Die Zellzahl und die Viabilität sind entscheidende Parameter bei der großflächigen Überwachung einer Bioproduktion. Üblicherweise beinhaltet die Zählung einer Microcarrier Zellsuspension mehrere aufwendige Schritte. Zunächst werden die Zellen durch Trypsin enzymatisch von den Microcarriern abgelöst und anschließend mit Trypanblau angefärbt, wobei diese Methode zeitaufwändig und ungenau ist.
Ein Vergleich der Zählung einer Microcarrier Zellsuspension mit Trypsin und Trypanblau sowie mit dem NucleoCounter® macht den Unterschied deutlich: Im Vergleich zur herkömmlichen Zellzählung eliminiert der NucleoCounter® etliche Zentrifugations-, Inkubations- und Pipettierschritte und vermindert die benötigte Zeit auf weniger als 5 min.
Literatur
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